北京8月4日電 (記者 孫自法)在生命科學領域,基因組編輯技術的迅速發展和廣泛應用,為基礎研究和應用開發提供強大的技術支撐。不過,大片段DNA(脫氧核糖核酸)編輯一直面臨重大挑戰,對數千乃至數百萬鹼基的精準操縱更是基因編輯領域的核心難題,備受關注。 育種和基因治療有巨大應用潛力 來自中國科學院遺傳與發育生物學研究所(遺傳發育所)的消息說,該所高彩霞研究員團隊最新研發出一種新型可編程的染色體編輯技術(Programmable Chromosome Engineering,PCE)。該技術在動植物中實現了從千鹼基到兆鹼基級別DNA的多類型染色體精準操縱,顯著提升了真核生物基因組的操縱尺度和能力。 利用大片段DNA精準操縱技術,研究人員不僅能實現多基因疊加編輯,還可通過操控基因組結構變異,為作物性狀改良和遺傳疾病治療開闢新路徑。同時,該技術有望推動新型育種策略的發展,例如通過操縱遺傳連鎖、調控重組頻率實現育性控制,以及消除連鎖累贅,充分釋放野生種質資源中優異等位基因的育種潛力。此外,精準染色體編輯技術的突破將加速人工染色體構建,在合成生物學等新興領域也有重要的應用前景。 本項研究PCE系統的開發和精準染色體編輯示意圖。中國科學院遺傳發育所 供圖 這項攻克大片段DNA精準編輯的重要成果論文,北京時間8月4日深夜在國際知名學術期刊《細胞》(Cell)上線發表。審稿人評價認為,中國團隊發表的研究工作,代表了基因工程領域的重大突破,在育種和基因治療方面具有巨大的應用潛力。 系統應用受到3個關鍵問題制約 論文通訊作者高彩霞研究員介紹說,以基因編輯工具CRISPR及其衍生技術為代表的編輯系統,通過可編程的嚮導RNA(核糖核酸)引導Cas9等核酸酶靶向基因組特定位點,已廣泛應用於特定鹼基和短片段DNA的精準編輯。但針對大片段DNA編輯,現有工具在編輯效率、尺度、精準性及類型多樣性等方面仍存在明顯不足。 研究團隊發現,位點特異性重組酶(Cre-Lox)系統具有染色體水平DNA操縱潛力,其原理是在基因組中引入Lox序列後,由Cre重組酶介導Lox位點之間的DNA重組來實現全基因組範圍內的遺傳操縱。 然而,Cre-Lox系統的應用受到3個關鍵問題的制約:Lox位點固有的對稱性導致重組反應可逆,不利於目的編輯的發生;Cre酶作為四聚體工作,提升其活性的工程改造難度高;重組後特異性位點殘留,影響編輯的精準性。 構建兩個可編程染色體編輯系統 高彩霞指出,為逐一突破上述限制,在本項研究中,研究團隊構建出系統性技術路徑:首先,開發高通量重組位點快速改造平臺,並提出不對稱Lox位點設計原則,成功創製新型Lox變體,保持高效重組效率的同時將可逆重組活性降低至陰性對照水平。 其次,基於研究團隊此前自主開發的融合蛋白通用逆摺疊模型、結構與進化約束信息的蛋白定向進化平臺AiCE,實現對Cre蛋白多聚化界面的精準優化,獲得重組效率提升至3.5倍的工程化Cre蛋白變體。 最後,研究團隊創建並優化了重組酶的無痕編輯策略Re-pegRNA,利用引導編輯器的高效編輯特性,通過設計特異性pegRNA對重組後殘留的Lox位點進行「重引導編輯」,將其精準替換為原有基因組序列。 通過這三項技術的集成優化,研究團隊成功構建PCE與RePCE兩個可編程染色體編輯系統,可對不同Lox位點的插入位置和方向進行靈活編程,實現鹼基從千比特(kb)到兆比特(Mb)尺度的大片段DNA精準無痕操縱。 研究團隊表示,他們在動植物細胞中,利用新研發的系統已成功實現18.8 kb超大片段DNA的定點整合、5 kb序列的定向替換、12 Mb的染色體倒位、4 Mb的染色體刪除及整條染色體的易位。他們還利用新型大片段DNA精準操縱技術,成功創製含315 kb精準倒位的抗除草劑水稻種質,展示出其廣泛應用前景。 據了解,AiCE成果7月上旬已在線發表於《細胞》,並將與此次研究成果以背靠背形式於8月下旬在《細胞》紙質版正式刊出。(完)
繼去年10月在上海首次亮相後,上個周末,由阿里魚「啊!鯉魚」出品、三麗鷗授權的第二屆三麗鷗嗨翻節正式回歸。本屆活動以「夏日音樂派對」為主題,在上海世博展覽館搭建了25000平方米活動區域,涵蓋19個IP組成的7大展區、限定舞臺演出、三麗鷗大明星見面會、IP設計師籤繪以及周邊商品售賣等內容,吸引超2萬人次參與,尤其是活動的特典票,開票後立即售罄。活動現場三麗鷗是一家以可愛卡通形象而聞名的公司,旗下最為人所熟知的角色是誕生於1974年的Hello Kitty,此外還擁有美樂蒂、酷洛米、雙子星、大耳狗、布丁狗、蛋黃哥、職場小烈、巧克貓、酷企鵝、大眼蛙等知名二次元IP。今年展區設計再度升級,打造了沙灘、草地、森林、泳池等多元主題場景,7大展區集結了「三麗鷗家族」的19個IP,較去年新增5個,滿足二次元愛好者的需求。步入展館,蛋黃哥、布丁狗、許願兔及小麥粉精靈以元氣姿態迎接觀眾;在巨型復古收音機造型的中央球池,Hello Kitty與雙子星熱情邀約觀眾共赴狂歡;帕恰狗和酷企鵝的泳池派對氛圍正酣;不遠處,酷洛米與美樂蒂的沙灘甜品屋亦在火熱營業。而在草地區域,大耳狗和必愛諾正愜意享受野餐;三麗鷗男團遊樂園限時開放,觀眾可參與遊樂設施挑戰,贏取限定貼紙。三麗鷗中國在今年3月發布的全新IP雪球奈奈、叨克勒、草球貓也攜手亮相三麗鷗嗨翻節,這是它們首次在線下與中國粉絲見面。 在嗨翻節現場,舞臺上的「紅藍對抗賽」吸引了不少觀眾,Hello Kitty、酷洛米、美樂蒂、必愛諾和布丁狗組成紅隊,大耳狗和三麗鷗男團組成藍隊;兩隊還邀請了楊芸晴、劉也、力丸、李藝彤、趙讓和汪東城六位偶像歌手助陣,獻上限定合作舞臺。展館現場隨處可見身著IP元素的粉絲打卡交流,以及全家出動的親子場景。「去年就期待與布丁狗互動合影,今年終於如願。」「期待三麗鷗嗨翻節越辦越好,明年再見。」有粉絲說。 在籤繪舞臺區域,7位三麗鷗IP肖像設計師親臨現場,提供Hello Kitty、美樂蒂、酷洛米、必愛諾、半魚人漢頓等10位IP角色的籤繪。可愛角色躍然紙上,一位Hello Kitty粉絲激動地說:「期待了好久,終於等到這一天,山口裕子老師畫的時候我眼睛都不敢眨。」籤繪現場在穀子經濟方面,除授權商家聯動外,本次活動特設場販(指在特定活動現場進行的販賣行為,以及通過這種方式銷售的商品)售賣區。三麗鷗官方首發甜品烘焙系列引發搶購熱潮;Hello Kitty的一天系列、薄荷巧克力系列、人物大賞第二彈系列、心意綻放系列等商品同步亮相。此外,基於本屆活動的主題圖庫,還策劃推出了限定毛絨、吧唧、冰箱貼、亞克力掛件、發箍等商品。粉絲選購喜愛的穀子「在與三麗鷗密切協作的三年間,我們共同探索多元化IP娛樂內容,深化了中國用戶與三麗鷗家族的情感聯結。」阿里魚總裁吳倩表示,「三麗鷗家族早已超越角色形象,成為了一種文化符號,並持續引領著年輕世代的前沿生活方式,陪伴人們在日常中感受到幸福與美好。」
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