北京8月4日電 (記者 孫自法)在生命科學領域,基因組編輯技術的迅速發展和廣泛應用,為基礎研究和應用開發提供強大的技術支撐。不過,大片段DNA(脫氧核糖核酸)編輯一直面臨重大挑戰,對數千乃至數百萬鹼基的精準操縱更是基因編輯領域的核心難題,備受關注。 育種和基因治療有巨大應用潛力 來自中國科學院遺傳與發育生物學研究所(遺傳發育所)的消息說,該所高彩霞研究員團隊最新研發出一種新型可編程的染色體編輯技術(Programmable Chromosome Engineering,PCE)。該技術在動植物中實現了從千鹼基到兆鹼基級別DNA的多類型染色體精準操縱,顯著提升了真核生物基因組的操縱尺度和能力。 利用大片段DNA精準操縱技術,研究人員不僅能實現多基因疊加編輯,還可通過操控基因組結構變異,為作物性狀改良和遺傳疾病治療開闢新路徑。同時,該技術有望推動新型育種策略的發展,例如通過操縱遺傳連鎖、調控重組頻率實現育性控制,以及消除連鎖累贅,充分釋放野生種質資源中優異等位基因的育種潛力。此外,精準染色體編輯技術的突破將加速人工染色體構建,在合成生物學等新興領域也有重要的應用前景。 本項研究PCE系統的開發和精準染色體編輯示意圖。中國科學院遺傳發育所 供圖 這項攻克大片段DNA精準編輯的重要成果論文,北京時間8月4日深夜在國際知名學術期刊《細胞》(Cell)上線發表。審稿人評價認為,中國團隊發表的研究工作,代表了基因工程領域的重大突破,在育種和基因治療方面具有巨大的應用潛力。 系統應用受到3個關鍵問題制約 論文通訊作者高彩霞研究員介紹說,以基因編輯工具CRISPR及其衍生技術為代表的編輯系統,通過可編程的嚮導RNA(核糖核酸)引導Cas9等核酸酶靶向基因組特定位點,已廣泛應用於特定鹼基和短片段DNA的精準編輯。但針對大片段DNA編輯,現有工具在編輯效率、尺度、精準性及類型多樣性等方面仍存在明顯不足。 研究團隊發現,位點特異性重組酶(Cre-Lox)系統具有染色體水平DNA操縱潛力,其原理是在基因組中引入Lox序列後,由Cre重組酶介導Lox位點之間的DNA重組來實現全基因組範圍內的遺傳操縱。 然而,Cre-Lox系統的應用受到3個關鍵問題的制約:Lox位點固有的對稱性導致重組反應可逆,不利於目的編輯的發生;Cre酶作為四聚體工作,提升其活性的工程改造難度高;重組後特異性位點殘留,影響編輯的精準性。 構建兩個可編程染色體編輯系統 高彩霞指出,為逐一突破上述限制,在本項研究中,研究團隊構建出系統性技術路徑:首先,開發高通量重組位點快速改造平臺,並提出不對稱Lox位點設計原則,成功創製新型Lox變體,保持高效重組效率的同時將可逆重組活性降低至陰性對照水平。 其次,基於研究團隊此前自主開發的融合蛋白通用逆摺疊模型、結構與進化約束信息的蛋白定向進化平臺AiCE,實現對Cre蛋白多聚化界面的精準優化,獲得重組效率提升至3.5倍的工程化Cre蛋白變體。 最後,研究團隊創建並優化了重組酶的無痕編輯策略Re-pegRNA,利用引導編輯器的高效編輯特性,通過設計特異性pegRNA對重組後殘留的Lox位點進行「重引導編輯」,將其精準替換為原有基因組序列。 通過這三項技術的集成優化,研究團隊成功構建PCE與RePCE兩個可編程染色體編輯系統,可對不同Lox位點的插入位置和方向進行靈活編程,實現鹼基從千比特(kb)到兆比特(Mb)尺度的大片段DNA精準無痕操縱。 研究團隊表示,他們在動植物細胞中,利用新研發的系統已成功實現18.8 kb超大片段DNA的定點整合、5 kb序列的定向替換、12 Mb的染色體倒位、4 Mb的染色體刪除及整條染色體的易位。他們還利用新型大片段DNA精準操縱技術,成功創製含315 kb精準倒位的抗除草劑水稻種質,展示出其廣泛應用前景。 據了解,AiCE成果7月上旬已在線發表於《細胞》,並將與此次研究成果以背靠背形式於8月下旬在《細胞》紙質版正式刊出。(完)
最近幾天,81歲的退役老兵孫灶立「火」了。7月31日上午8時許,上海楊浦公園內有人不慎落水,孫灶立不顧高齡跳入水中施救。隨著視頻在網上傳播,眾多網友紛紛為他的義舉點讚。今天(5日)上午,上海市和楊浦區退役軍人事務局、四平路街道相關負責人前往孫灶立家中,給老人送上鮮花和慰問品。之後,孫灶立向解放日報·上觀新聞記者講述了自己救人的故事。 孫灶立在家中接受記者採訪「我當時在楊浦公園裡鍛鍊,突然聽到不遠處有人喊『救命』。」孫灶立回憶,他匆忙趕到現場時,就看到有位阿婆面朝下漂浮在水面上,一動不動。孫灶立顧不上脫外衣就下水救人。「我從小就會遊泳,還在海軍部隊服役過,水性好。」孫灶立說,好在水不算深,沒到他胸口,涉水到落水者旁邊後,他便奮力將她託起往岸邊移動,「落水的人還在不停地吃水,哪怕快一秒也好,就想著要儘快把她救上來。」然而,孫灶立畢竟年事已高,此次救人也頗感吃力。中途孫灶立因體力透支,不得不停下來喘息。後來,在周圍群眾的協助下,阿婆成功獲救,孫灶立也被拉上岸。此時,他面色蒼白,感到身體有些不適。「周圍群眾都很熱心,等救護車的時候,有人看到我衣褲都溼了,提醒我得趕緊脫掉。有位爺叔還把自己的上衣脫下來,讓我穿上。」 在周圍群眾幫助下,落水阿婆被救上岸急救人員趕到後,孫灶立和阿婆都被送往醫院進一步觀察,好在均無大礙。對於孫灶立勇救落水者一事,他和家人和戰友都不感到意外。在得知孫灶立英勇救人的事跡後,幾位當年的戰友專程前來看望,其中一人帶了一張塑封好的報紙,頭版頭條寫著「65歲老人勇救3名落水盲人」。故事的主角,正是孫灶立。原來,2009年65歲的他就曾在和平公園救起3名落水盲人,當時他在近2米深的水中往返數次,將遇險者一一救上岸。「我以後還會救人,只要身子骨還硬朗!」當年接受採訪時,孫灶立這樣說。16年後,他用實際行動踐行了自己的諾言。在被問到如此高齡還下水救人,有沒有感到害怕時,這位1965年入伍、參加過抗美援越的老人搖了搖頭:「在部隊當兵時,我就知道遇到危險要挺身而出,要保護人民群眾,這是我作為軍人應該做的。」像孫灶立這樣的退役軍人,在上海還有很多。市退役軍人事務局相關負責人表示,此次慰問勇救落水者的孫灶立老人,就是要在全社會營造崇尚英雄、尊崇軍人的濃厚氛圍。近年來,上海始終高度重視退役軍人服務保障和思想政治引領工作,努力打造具有溫度的退役軍人服務「樣板」。通過持續開展烈士褒揚、「最美退役軍人」學習宣傳活動、「老兵永遠跟黨走」主題宣講活動和送立功喜報、懸掛光榮牌等活動,不斷提升退役軍人的榮譽感與獲得感。
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