北京8月4日電 (記者 孫自法)在生命科學領域,基因組編輯技術的迅速發展和廣泛應用,為基礎研究和應用開發提供強大的技術支撐。不過,大片段DNA(脫氧核糖核酸)編輯一直面臨重大挑戰,對數千乃至數百萬鹼基的精準操縱更是基因編輯領域的核心難題,備受關注。 育種和基因治療有巨大應用潛力 來自中國科學院遺傳與發育生物學研究所(遺傳發育所)的消息說,該所高彩霞研究員團隊最新研發出一種新型可編程的染色體編輯技術(Programmable Chromosome Engineering,PCE)。該技術在動植物中實現了從千鹼基到兆鹼基級別DNA的多類型染色體精準操縱,顯著提升了真核生物基因組的操縱尺度和能力。 利用大片段DNA精準操縱技術,研究人員不僅能實現多基因疊加編輯,還可通過操控基因組結構變異,為作物性狀改良和遺傳疾病治療開闢新路徑。同時,該技術有望推動新型育種策略的發展,例如通過操縱遺傳連鎖、調控重組頻率實現育性控制,以及消除連鎖累贅,充分釋放野生種質資源中優異等位基因的育種潛力。此外,精準染色體編輯技術的突破將加速人工染色體構建,在合成生物學等新興領域也有重要的應用前景。 本項研究PCE系統的開發和精準染色體編輯示意圖。中國科學院遺傳發育所 供圖 這項攻克大片段DNA精準編輯的重要成果論文,北京時間8月4日深夜在國際知名學術期刊《細胞》(Cell)上線發表。審稿人評價認為,中國團隊發表的研究工作,代表了基因工程領域的重大突破,在育種和基因治療方面具有巨大的應用潛力。 系統應用受到3個關鍵問題制約 論文通訊作者高彩霞研究員介紹說,以基因編輯工具CRISPR及其衍生技術為代表的編輯系統,通過可編程的嚮導RNA(核糖核酸)引導Cas9等核酸酶靶向基因組特定位點,已廣泛應用於特定鹼基和短片段DNA的精準編輯。但針對大片段DNA編輯,現有工具在編輯效率、尺度、精準性及類型多樣性等方面仍存在明顯不足。 研究團隊發現,位點特異性重組酶(Cre-Lox)系統具有染色體水平DNA操縱潛力,其原理是在基因組中引入Lox序列後,由Cre重組酶介導Lox位點之間的DNA重組來實現全基因組範圍內的遺傳操縱。 然而,Cre-Lox系統的應用受到3個關鍵問題的制約:Lox位點固有的對稱性導致重組反應可逆,不利於目的編輯的發生;Cre酶作為四聚體工作,提升其活性的工程改造難度高;重組後特異性位點殘留,影響編輯的精準性。 構建兩個可編程染色體編輯系統 高彩霞指出,為逐一突破上述限制,在本項研究中,研究團隊構建出系統性技術路徑:首先,開發高通量重組位點快速改造平臺,並提出不對稱Lox位點設計原則,成功創製新型Lox變體,保持高效重組效率的同時將可逆重組活性降低至陰性對照水平。 其次,基於研究團隊此前自主開發的融合蛋白通用逆摺疊模型、結構與進化約束信息的蛋白定向進化平臺AiCE,實現對Cre蛋白多聚化界面的精準優化,獲得重組效率提升至3.5倍的工程化Cre蛋白變體。 最後,研究團隊創建並優化了重組酶的無痕編輯策略Re-pegRNA,利用引導編輯器的高效編輯特性,通過設計特異性pegRNA對重組後殘留的Lox位點進行「重引導編輯」,將其精準替換為原有基因組序列。 通過這三項技術的集成優化,研究團隊成功構建PCE與RePCE兩個可編程染色體編輯系統,可對不同Lox位點的插入位置和方向進行靈活編程,實現鹼基從千比特(kb)到兆比特(Mb)尺度的大片段DNA精準無痕操縱。 研究團隊表示,他們在動植物細胞中,利用新研發的系統已成功實現18.8 kb超大片段DNA的定點整合、5 kb序列的定向替換、12 Mb的染色體倒位、4 Mb的染色體刪除及整條染色體的易位。他們還利用新型大片段DNA精準操縱技術,成功創製含315 kb精準倒位的抗除草劑水稻種質,展示出其廣泛應用前景。 據了解,AiCE成果7月上旬已在線發表於《細胞》,並將與此次研究成果以背靠背形式於8月下旬在《細胞》紙質版正式刊出。(完)
廣州8月13日電 (王堅 張媛)據水利部珠江水利委員會(下稱「珠江委」)13日消息,受颱風「楊柳」影響,13日至15日,珠江流域自東向西將出現一次強降雨過程,暴雨區內發生中小河流超警洪水、山洪地質災害、城市內澇風險較大。 廣東氣象部門預計,「楊柳」將於13日中午前後在臺灣登陸,並將於13日夜間至14日凌晨在福建南部到廣東東部一帶沿海再次登陸。 珠江委表示,在「楊柳」影響下,13至15日,珠江流域自東向西將出現一次強降雨過程,福建南部、廣東中東部、廣西中北部等地有50至100毫米,部分地區可能有100至200毫米。預計,西江支流桂江、賀江,北江幹流及支流連江,東江支流新豐江,韓江等河流將出現明顯漲水過程,暴雨區內發生中小河流超警洪水、山洪地質災害、城市內澇風險較大。 鑑於颱風防禦形勢,珠江防總已於12日19時啟動防汛防颱風Ⅳ級應急響應,珠江委同步啟動洪水防禦Ⅳ級應急響應。 珠江防總常務副總指揮、珠江委主任吳小龍高度重視颱風「楊柳」暴雨洪水防禦工作,強調要深入全面落實水利部部署要求,毫不鬆懈堅持防汛關鍵期精神狀態、工作機制,錨定防汛「四不」目標,做到風險預報預警再細化、隱患排查整治再深入、應急值班值守再加強,以萬全準備做好防汛防颱風各項工作,全力保障人民群眾生命財產安全。 珠江委現已召開防汛會商會,滾動分析研判颱風「楊柳」動態和流域防汛形勢,針對性部署颱風暴雨洪水防禦工作。 會商要求,要緊盯颱風發展態勢、移動路徑、強降雨影響範圍,滾動會商研判,加密洪水預測預報頻次,及時發布預警信息。要系統、科學、安全、精準調度流域防洪工程體系,充分做好韓江、東江、北江、賀江等流域水庫群調度運用準備,適時攔洪削峰錯峰;同時,在確保防洪安全的前提下,統籌多目標綜合調度,實現水資源綜合效益最大化。 此外,要突出抓好山洪災害防禦,嚴密防範中小河流洪水,切實做好涉水在建工程、中小水庫、病險水庫等安全度汛工作等。(完)
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