北京8月4日電 (記者 孫自法)在生命科學領域,基因組編輯技術的迅速發展和廣泛應用,為基礎研究和應用開發提供強大的技術支撐。不過,大片段DNA(脫氧核糖核酸)編輯一直面臨重大挑戰,對數千乃至數百萬鹼基的精準操縱更是基因編輯領域的核心難題,備受關注。 育種和基因治療有巨大應用潛力 來自中國科學院遺傳與發育生物學研究所(遺傳發育所)的消息說,該所高彩霞研究員團隊最新研發出一種新型可編程的染色體編輯技術(Programmable Chromosome Engineering,PCE)。該技術在動植物中實現了從千鹼基到兆鹼基級別DNA的多類型染色體精準操縱,顯著提升了真核生物基因組的操縱尺度和能力。 利用大片段DNA精準操縱技術,研究人員不僅能實現多基因疊加編輯,還可通過操控基因組結構變異,為作物性狀改良和遺傳疾病治療開闢新路徑。同時,該技術有望推動新型育種策略的發展,例如通過操縱遺傳連鎖、調控重組頻率實現育性控制,以及消除連鎖累贅,充分釋放野生種質資源中優異等位基因的育種潛力。此外,精準染色體編輯技術的突破將加速人工染色體構建,在合成生物學等新興領域也有重要的應用前景。 本項研究PCE系統的開發和精準染色體編輯示意圖。中國科學院遺傳發育所 供圖 這項攻克大片段DNA精準編輯的重要成果論文,北京時間8月4日深夜在國際知名學術期刊《細胞》(Cell)上線發表。審稿人評價認為,中國團隊發表的研究工作,代表了基因工程領域的重大突破,在育種和基因治療方面具有巨大的應用潛力。 系統應用受到3個關鍵問題制約 論文通訊作者高彩霞研究員介紹說,以基因編輯工具CRISPR及其衍生技術為代表的編輯系統,通過可編程的嚮導RNA(核糖核酸)引導Cas9等核酸酶靶向基因組特定位點,已廣泛應用於特定鹼基和短片段DNA的精準編輯。但針對大片段DNA編輯,現有工具在編輯效率、尺度、精準性及類型多樣性等方面仍存在明顯不足。 研究團隊發現,位點特異性重組酶(Cre-Lox)系統具有染色體水平DNA操縱潛力,其原理是在基因組中引入Lox序列後,由Cre重組酶介導Lox位點之間的DNA重組來實現全基因組範圍內的遺傳操縱。 然而,Cre-Lox系統的應用受到3個關鍵問題的制約:Lox位點固有的對稱性導致重組反應可逆,不利於目的編輯的發生;Cre酶作為四聚體工作,提升其活性的工程改造難度高;重組後特異性位點殘留,影響編輯的精準性。 構建兩個可編程染色體編輯系統 高彩霞指出,為逐一突破上述限制,在本項研究中,研究團隊構建出系統性技術路徑:首先,開發高通量重組位點快速改造平臺,並提出不對稱Lox位點設計原則,成功創製新型Lox變體,保持高效重組效率的同時將可逆重組活性降低至陰性對照水平。 其次,基於研究團隊此前自主開發的融合蛋白通用逆摺疊模型、結構與進化約束信息的蛋白定向進化平臺AiCE,實現對Cre蛋白多聚化界面的精準優化,獲得重組效率提升至3.5倍的工程化Cre蛋白變體。 最後,研究團隊創建並優化了重組酶的無痕編輯策略Re-pegRNA,利用引導編輯器的高效編輯特性,通過設計特異性pegRNA對重組後殘留的Lox位點進行「重引導編輯」,將其精準替換為原有基因組序列。 通過這三項技術的集成優化,研究團隊成功構建PCE與RePCE兩個可編程染色體編輯系統,可對不同Lox位點的插入位置和方向進行靈活編程,實現鹼基從千比特(kb)到兆比特(Mb)尺度的大片段DNA精準無痕操縱。 研究團隊表示,他們在動植物細胞中,利用新研發的系統已成功實現18.8 kb超大片段DNA的定點整合、5 kb序列的定向替換、12 Mb的染色體倒位、4 Mb的染色體刪除及整條染色體的易位。他們還利用新型大片段DNA精準操縱技術,成功創製含315 kb精準倒位的抗除草劑水稻種質,展示出其廣泛應用前景。 據了解,AiCE成果7月上旬已在線發表於《細胞》,並將與此次研究成果以背靠背形式於8月下旬在《細胞》紙質版正式刊出。(完)
北京8月4日電(記者 王昊)8月4日,中超山東泰山隊守門員王大雷就自己被紅牌罰下後扔隊長袖標一事發文道歉。他表示,自己當時情緒激動,只是想把袖標扔給隊友,動作太隨意,「對不起各位球迷朋友們的期待了」。 王大雷被判罰紅牌。圖片來源:ICphoto 8月2日,在中超第19輪比賽中,山東泰山客場挑戰成都蓉城。比賽下半場,王大雷被紅牌罰下。 這一幕發生在比賽第58分鐘,王大雷出擊到禁區外,放倒了成都隊球員費利佩。主裁判一開始判罰黃牌,隨後VAR介入,他在觀看回放後將黃牌改為紅牌,王大雷被罰下。 現場視頻顯示,王大雷在離場時有幾名隊友前來安慰他。王大雷摘下左臂上的隊長袖標後扔向李源一的方向,袖標落在了地上,隨後李源一撿起袖標。 這張紅牌一定程度上改變了比賽的走向,此前兩隊場上比分為1:1,王大雷被罰下場後7分鐘,成都蓉城再進一球。最終,山東泰山1:2負於成都蓉城,遭遇對手的賽季三殺。 賽後,王大雷的紅牌和扔隊長袖標的行為引發了球迷的激烈討論。部分媒體和球迷認為,這次犯規的程度出示黃牌更為合適,紅牌有些處罰過重;也有媒體和球迷表示,紅牌的處罰並沒有問題。 王大雷今年36歲,是山東泰山的功勳球員,隨隊獲得過中超聯賽、足協杯冠軍。關於他扔隊長袖標的行為,球迷的觀點主要分為兩類: 第一類認為,這種行為就是不尊重球隊,希望對王大雷有一定處罰; 微博截圖 微博截圖 第二類認為,該行為只是當時情緒激動所致,沒有必要上綱上線。 微博截圖 微博截圖 在事情發生兩天後,輿論依舊沒有平息,王大雷今日發文道歉。他表示:「比賽中我被罰出場,當時情緒很激動,心裡想著要把隊長袖標給源一,就不加考慮直接扔給他了。是我考慮不周到,動作太隨意,對不起各位球迷朋友們的期待了。」 微博截圖 王大雷還在文中感謝了球迷的支持:這麼多年,不管順境逆境,都是球迷朋友們在背後支持我,真心謝謝大家。現在這個階段,俱樂部、球員,還有每一位球迷,我們都是一家人,一股勁往前衝。贏了一起高興,輸了一起扛著,讓球隊越來越好。 此外,他表態會吸取教訓,讓自己更冷靜、更穩當。「不辜負你們的信任和支持,和大家一起,為這支球隊繼續拼下去!」 王大雷發文致歉後,評論區多數球迷持諒解態度,希望能夠趕緊「翻篇」,聚焦於球隊的賽場內表現。 中超聯賽19輪過後,山東泰山以8勝4平7負的成績排名積分榜第八位。(完)
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