北京8月4日電 (記者 孫自法)在生命科學領域,基因組編輯技術的迅速發展和廣泛應用,為基礎研究和應用開發提供強大的技術支撐。不過,大片段DNA(脫氧核糖核酸)編輯一直面臨重大挑戰,對數千乃至數百萬鹼基的精準操縱更是基因編輯領域的核心難題,備受關注。 育種和基因治療有巨大應用潛力 來自中國科學院遺傳與發育生物學研究所(遺傳發育所)的消息說,該所高彩霞研究員團隊最新研發出一種新型可編程的染色體編輯技術(Programmable Chromosome Engineering,PCE)。該技術在動植物中實現了從千鹼基到兆鹼基級別DNA的多類型染色體精準操縱,顯著提升了真核生物基因組的操縱尺度和能力。 利用大片段DNA精準操縱技術,研究人員不僅能實現多基因疊加編輯,還可通過操控基因組結構變異,為作物性狀改良和遺傳疾病治療開闢新路徑。同時,該技術有望推動新型育種策略的發展,例如通過操縱遺傳連鎖、調控重組頻率實現育性控制,以及消除連鎖累贅,充分釋放野生種質資源中優異等位基因的育種潛力。此外,精準染色體編輯技術的突破將加速人工染色體構建,在合成生物學等新興領域也有重要的應用前景。 本項研究PCE系統的開發和精準染色體編輯示意圖。中國科學院遺傳發育所 供圖 這項攻克大片段DNA精準編輯的重要成果論文,北京時間8月4日深夜在國際知名學術期刊《細胞》(Cell)上線發表。審稿人評價認為,中國團隊發表的研究工作,代表了基因工程領域的重大突破,在育種和基因治療方面具有巨大的應用潛力。 系統應用受到3個關鍵問題制約 論文通訊作者高彩霞研究員介紹說,以基因編輯工具CRISPR及其衍生技術為代表的編輯系統,通過可編程的嚮導RNA(核糖核酸)引導Cas9等核酸酶靶向基因組特定位點,已廣泛應用於特定鹼基和短片段DNA的精準編輯。但針對大片段DNA編輯,現有工具在編輯效率、尺度、精準性及類型多樣性等方面仍存在明顯不足。 研究團隊發現,位點特異性重組酶(Cre-Lox)系統具有染色體水平DNA操縱潛力,其原理是在基因組中引入Lox序列後,由Cre重組酶介導Lox位點之間的DNA重組來實現全基因組範圍內的遺傳操縱。 然而,Cre-Lox系統的應用受到3個關鍵問題的制約:Lox位點固有的對稱性導致重組反應可逆,不利於目的編輯的發生;Cre酶作為四聚體工作,提升其活性的工程改造難度高;重組後特異性位點殘留,影響編輯的精準性。 構建兩個可編程染色體編輯系統 高彩霞指出,為逐一突破上述限制,在本項研究中,研究團隊構建出系統性技術路徑:首先,開發高通量重組位點快速改造平臺,並提出不對稱Lox位點設計原則,成功創製新型Lox變體,保持高效重組效率的同時將可逆重組活性降低至陰性對照水平。 其次,基於研究團隊此前自主開發的融合蛋白通用逆摺疊模型、結構與進化約束信息的蛋白定向進化平臺AiCE,實現對Cre蛋白多聚化界面的精準優化,獲得重組效率提升至3.5倍的工程化Cre蛋白變體。 最後,研究團隊創建並優化了重組酶的無痕編輯策略Re-pegRNA,利用引導編輯器的高效編輯特性,通過設計特異性pegRNA對重組後殘留的Lox位點進行「重引導編輯」,將其精準替換為原有基因組序列。 通過這三項技術的集成優化,研究團隊成功構建PCE與RePCE兩個可編程染色體編輯系統,可對不同Lox位點的插入位置和方向進行靈活編程,實現鹼基從千比特(kb)到兆比特(Mb)尺度的大片段DNA精準無痕操縱。 研究團隊表示,他們在動植物細胞中,利用新研發的系統已成功實現18.8 kb超大片段DNA的定點整合、5 kb序列的定向替換、12 Mb的染色體倒位、4 Mb的染色體刪除及整條染色體的易位。他們還利用新型大片段DNA精準操縱技術,成功創製含315 kb精準倒位的抗除草劑水稻種質,展示出其廣泛應用前景。 據了解,AiCE成果7月上旬已在線發表於《細胞》,並將與此次研究成果以背靠背形式於8月下旬在《細胞》紙質版正式刊出。(完)
海口8月12日電 (王曉斌 崔善紅)海南省高級人民法院(簡稱「海南高院」)12日召開海南法院涉外、涉港澳臺民商事審判新聞發布會。記者從發布會獲悉,海南已形成涉外民商事審判新格局,五年來共受理涉外、涉港澳臺民商事案件5136件。 當前,海南涉外民商事審判格局以海南高院民事審判第四庭為引領,以海南自由貿易港第一國際商事法庭和海南自由貿易港第二國際商事法庭為示範,以海南自由貿易港智慧財產權法院、海口海事法院和三沙市中級人民法院為特色,以海口市秀英區人民法院、文昌市人民法院、洋浦經濟開發區人民法院、三亞市城郊人民法院、三沙群島人民法院5家基層法院為支撐。 海南自由貿易港第一國際商事法庭和海南自由貿易港第二國際商事法庭是中國最早建立「立案、審判、執行」一體化、跨區域管轄涉外民商事案件的專門法庭。這兩個國際商事法庭構建了示範性涉外訴訟服務工作體系,探索通過線上核實境外當事人及委託代理人身份及訴訟退費及執行領款等便捷方式,便利境內外當事人訴訟。 推動糾紛多元化解方面,海南法院與中國國際貿易促進委員會調解中心等10餘家境內外機構籤署合作框架協議,共同參與國際商事糾紛化解工作,不斷完善多元解紛機制。海南省第一中級人民法院創建國際商事糾紛訴訟、仲裁、調解「三位一體」機制,多部門協同、境內外調解組織聯動,形成解紛合力。該院還自主研發創設可在全球範圍內開展涉外民商事糾紛化解的在線多元化解平臺,做到訴、調、裁無縫對接。 作為解決國際商事糾紛的靈活高效工具,臨時仲裁已在海南落地實施。海南法院創新構建臨時仲裁司法審查機制,推出的「協議管轄示範條款」明確,當事人即使與中國無實際聯繫亦可協議選擇海南法院進行管轄。海南法院還發布確認仲裁協議效力案件的裁判指引及商事仲裁司法審查白皮書,建立撤銷仲裁前與仲裁機構會商制度,有效維護仲裁的穩定性和公信力。 海南高院方面介紹,海南近年來的涉外、涉港澳臺民商事案件呈現以下特點:案件數量穩中有升,案件類型逐漸多樣化,涉外當事人來源日益廣泛,案件標的額持續增加,司法協助需求增加,調解撤訴效果顯著。五年來,海南法院涉外、涉港澳臺民商事案件的調解、撤訴比例達到40.14%,多元糾紛化解機製成效明顯。(完)
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