北京8月4日電 (記者 孫自法)在生命科學領域,基因組編輯技術的迅速發展和廣泛應用,為基礎研究和應用開發提供強大的技術支撐。不過,大片段DNA(脫氧核糖核酸)編輯一直面臨重大挑戰,對數千乃至數百萬鹼基的精準操縱更是基因編輯領域的核心難題,備受關注。 育種和基因治療有巨大應用潛力 來自中國科學院遺傳與發育生物學研究所(遺傳發育所)的消息說,該所高彩霞研究員團隊最新研發出一種新型可編程的染色體編輯技術(Programmable Chromosome Engineering,PCE)。該技術在動植物中實現了從千鹼基到兆鹼基級別DNA的多類型染色體精準操縱,顯著提升了真核生物基因組的操縱尺度和能力。 利用大片段DNA精準操縱技術,研究人員不僅能實現多基因疊加編輯,還可通過操控基因組結構變異,為作物性狀改良和遺傳疾病治療開闢新路徑。同時,該技術有望推動新型育種策略的發展,例如通過操縱遺傳連鎖、調控重組頻率實現育性控制,以及消除連鎖累贅,充分釋放野生種質資源中優異等位基因的育種潛力。此外,精準染色體編輯技術的突破將加速人工染色體構建,在合成生物學等新興領域也有重要的應用前景。 本項研究PCE系統的開發和精準染色體編輯示意圖。中國科學院遺傳發育所 供圖 這項攻克大片段DNA精準編輯的重要成果論文,北京時間8月4日深夜在國際知名學術期刊《細胞》(Cell)上線發表。審稿人評價認為,中國團隊發表的研究工作,代表了基因工程領域的重大突破,在育種和基因治療方面具有巨大的應用潛力。 系統應用受到3個關鍵問題制約 論文通訊作者高彩霞研究員介紹說,以基因編輯工具CRISPR及其衍生技術為代表的編輯系統,通過可編程的嚮導RNA(核糖核酸)引導Cas9等核酸酶靶向基因組特定位點,已廣泛應用於特定鹼基和短片段DNA的精準編輯。但針對大片段DNA編輯,現有工具在編輯效率、尺度、精準性及類型多樣性等方面仍存在明顯不足。 研究團隊發現,位點特異性重組酶(Cre-Lox)系統具有染色體水平DNA操縱潛力,其原理是在基因組中引入Lox序列後,由Cre重組酶介導Lox位點之間的DNA重組來實現全基因組範圍內的遺傳操縱。 然而,Cre-Lox系統的應用受到3個關鍵問題的制約:Lox位點固有的對稱性導致重組反應可逆,不利於目的編輯的發生;Cre酶作為四聚體工作,提升其活性的工程改造難度高;重組後特異性位點殘留,影響編輯的精準性。 構建兩個可編程染色體編輯系統 高彩霞指出,為逐一突破上述限制,在本項研究中,研究團隊構建出系統性技術路徑:首先,開發高通量重組位點快速改造平臺,並提出不對稱Lox位點設計原則,成功創製新型Lox變體,保持高效重組效率的同時將可逆重組活性降低至陰性對照水平。 其次,基於研究團隊此前自主開發的融合蛋白通用逆摺疊模型、結構與進化約束信息的蛋白定向進化平臺AiCE,實現對Cre蛋白多聚化界面的精準優化,獲得重組效率提升至3.5倍的工程化Cre蛋白變體。 最後,研究團隊創建並優化了重組酶的無痕編輯策略Re-pegRNA,利用引導編輯器的高效編輯特性,通過設計特異性pegRNA對重組後殘留的Lox位點進行「重引導編輯」,將其精準替換為原有基因組序列。 通過這三項技術的集成優化,研究團隊成功構建PCE與RePCE兩個可編程染色體編輯系統,可對不同Lox位點的插入位置和方向進行靈活編程,實現鹼基從千比特(kb)到兆比特(Mb)尺度的大片段DNA精準無痕操縱。 研究團隊表示,他們在動植物細胞中,利用新研發的系統已成功實現18.8 kb超大片段DNA的定點整合、5 kb序列的定向替換、12 Mb的染色體倒位、4 Mb的染色體刪除及整條染色體的易位。他們還利用新型大片段DNA精準操縱技術,成功創製含315 kb精準倒位的抗除草劑水稻種質,展示出其廣泛應用前景。 據了解,AiCE成果7月上旬已在線發表於《細胞》,並將與此次研究成果以背靠背形式於8月下旬在《細胞》紙質版正式刊出。(完)
陳陽禮是雲南省巧家縣小河鎮普谷村夥房社村民,從他家到鎮上開車要50分鐘,再到縣裡則需3個半小時。過去,他多次外出找工作都因缺乏技能而碰壁,「要麼老闆不要,要麼給的工資很低工作還很累,只能在周邊村組打零工,務工收入時有時無。」生活的困境讓他渴望改變,卻苦於沒有機會。轉機出現在今年6月。通過前期精準排摸,了解到當地群眾技能培訓需求後,普陀區專門為小河鎮普谷村送來了電工培訓班,陳陽禮成為了其中一名學員。培訓結束後,巧家縣人社部門接續深化服務,幫助陳陽禮順利拿到了電工證。「這次普陀區把電工培訓送到我家門口,我第一時間就報名。現在掌握了一門技術,有了電工證,以後再外出找工作就有底氣了!聽說我們培訓的費用還是普陀區幫扶我們的,真希望有機會當面對他們說一聲感謝!」陳陽禮高興地說。而這,只是普陀區開展滬滇勞務協作職業技能培訓工作的一個縮影。為深入貫徹落實黨中央關於東西部協作的重要決策部署,進一步鞏固拓展脫貧攻堅成果,全面推進鄉村振興,普陀區深化滬滇勞務協作交流,以技能幫扶助力當地勞動力提升崗位技能,開展送教上門系列活動,讓群眾在家門口學到實用技能,實現就業穩定、收入穩定,真正達到「培訓一人、就業一人、致富一戶」的目的。自2021年以來,普陀區與巧家縣人社局緊扣覆蓋面更廣、效果更好」兩大目標,圍繞當地產業發展需要、勞動力市場需求和群眾意願三大著力點,堅持理論與實操相結合的培訓模式,合作開展滬滇勞務協作職業技能培訓8場,涵蓋家政服務員、養老護理員、電工等多個實用技能課程,累計培訓人員400餘人次。巧家縣人社局也結合當地勞動力技能提升實際,開展家門口的技能培訓服務,投入滬滇協作資金126萬元,培訓脫貧勞動力3000餘人次,為固拓展脫貧攻堅成果,推進鄉村振興提供了強大人力人才支撐。接下來,普陀區將持續深入推進滬滇勞務協作工作,拓展和優化技能培訓項目,探索建立「對接需求-精準培訓-定向輸送-穩定就業」的全過程協作鏈條,讓更多的群眾在家門口就能學到實用技能,擁有一技之長。
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