北京8月4日電 (記者 孫自法)在生命科學領域,基因組編輯技術的迅速發展和廣泛應用,為基礎研究和應用開發提供強大的技術支撐。不過,大片段DNA(脫氧核糖核酸)編輯一直面臨重大挑戰,對數千乃至數百萬鹼基的精準操縱更是基因編輯領域的核心難題,備受關注。 育種和基因治療有巨大應用潛力 來自中國科學院遺傳與發育生物學研究所(遺傳發育所)的消息說,該所高彩霞研究員團隊最新研發出一種新型可編程的染色體編輯技術(Programmable Chromosome Engineering,PCE)。該技術在動植物中實現了從千鹼基到兆鹼基級別DNA的多類型染色體精準操縱,顯著提升了真核生物基因組的操縱尺度和能力。 利用大片段DNA精準操縱技術,研究人員不僅能實現多基因疊加編輯,還可通過操控基因組結構變異,為作物性狀改良和遺傳疾病治療開闢新路徑。同時,該技術有望推動新型育種策略的發展,例如通過操縱遺傳連鎖、調控重組頻率實現育性控制,以及消除連鎖累贅,充分釋放野生種質資源中優異等位基因的育種潛力。此外,精準染色體編輯技術的突破將加速人工染色體構建,在合成生物學等新興領域也有重要的應用前景。 本項研究PCE系統的開發和精準染色體編輯示意圖。中國科學院遺傳發育所 供圖 這項攻克大片段DNA精準編輯的重要成果論文,北京時間8月4日深夜在國際知名學術期刊《細胞》(Cell)上線發表。審稿人評價認為,中國團隊發表的研究工作,代表了基因工程領域的重大突破,在育種和基因治療方面具有巨大的應用潛力。 系統應用受到3個關鍵問題制約 論文通訊作者高彩霞研究員介紹說,以基因編輯工具CRISPR及其衍生技術為代表的編輯系統,通過可編程的嚮導RNA(核糖核酸)引導Cas9等核酸酶靶向基因組特定位點,已廣泛應用於特定鹼基和短片段DNA的精準編輯。但針對大片段DNA編輯,現有工具在編輯效率、尺度、精準性及類型多樣性等方面仍存在明顯不足。 研究團隊發現,位點特異性重組酶(Cre-Lox)系統具有染色體水平DNA操縱潛力,其原理是在基因組中引入Lox序列後,由Cre重組酶介導Lox位點之間的DNA重組來實現全基因組範圍內的遺傳操縱。 然而,Cre-Lox系統的應用受到3個關鍵問題的制約:Lox位點固有的對稱性導致重組反應可逆,不利於目的編輯的發生;Cre酶作為四聚體工作,提升其活性的工程改造難度高;重組後特異性位點殘留,影響編輯的精準性。 構建兩個可編程染色體編輯系統 高彩霞指出,為逐一突破上述限制,在本項研究中,研究團隊構建出系統性技術路徑:首先,開發高通量重組位點快速改造平臺,並提出不對稱Lox位點設計原則,成功創製新型Lox變體,保持高效重組效率的同時將可逆重組活性降低至陰性對照水平。 其次,基於研究團隊此前自主開發的融合蛋白通用逆摺疊模型、結構與進化約束信息的蛋白定向進化平臺AiCE,實現對Cre蛋白多聚化界面的精準優化,獲得重組效率提升至3.5倍的工程化Cre蛋白變體。 最後,研究團隊創建並優化了重組酶的無痕編輯策略Re-pegRNA,利用引導編輯器的高效編輯特性,通過設計特異性pegRNA對重組後殘留的Lox位點進行「重引導編輯」,將其精準替換為原有基因組序列。 通過這三項技術的集成優化,研究團隊成功構建PCE與RePCE兩個可編程染色體編輯系統,可對不同Lox位點的插入位置和方向進行靈活編程,實現鹼基從千比特(kb)到兆比特(Mb)尺度的大片段DNA精準無痕操縱。 研究團隊表示,他們在動植物細胞中,利用新研發的系統已成功實現18.8 kb超大片段DNA的定點整合、5 kb序列的定向替換、12 Mb的染色體倒位、4 Mb的染色體刪除及整條染色體的易位。他們還利用新型大片段DNA精準操縱技術,成功創製含315 kb精準倒位的抗除草劑水稻種質,展示出其廣泛應用前景。 據了解,AiCE成果7月上旬已在線發表於《細胞》,並將與此次研究成果以背靠背形式於8月下旬在《細胞》紙質版正式刊出。(完)
新華社北京8月11日電 題:增值稅法實施條例向社會公開徵求意見,有哪些看點? 新華社記者申鋮 記者11日從財政部了解到,為保障《中華人民共和國增值稅法》順利實施,財政部會同稅務總局研究起草了《中華人民共和國增值稅法實施條例(徵求意見稿)》,當日起向社會公開徵求意見。 增值稅是我國第一大稅種。去年底召開的十四屆全國人大常委會第十三次會議表決通過了增值稅法,自2026年1月1日起施行。 「增值稅法實施條例是增值稅法的基礎性配套行政法規,與增值稅法以及增值稅規範性政策文件一起構成了我國增值稅的法律法規體系,是增值稅法落地實施的重要保障。」中國財政科學研究院公共收入研究中心主任梁季說。 《中華人民共和國增值稅法實施條例(徵求意見稿)》包括總則、稅率、應納稅額、稅收優惠、徵收管理、附則等六章五十七條內容,主要對增值稅法有關規定進一步細化明確,對授權國務院規定的事項作出具體規定,進一步增強稅制的確定性和可操作性,形成配套銜接的增值稅制度體系。 中山大學法學院教授楊小強表示,以增值稅法為綱領,以增值稅法實施條例為重要配套法規,輔以增值稅法實施的具體辦法、操作辦法等規章,這是國際上很多國家採用的增值稅(有些國家稱為商品與服務稅)立法模式。比如,英國、澳大利亞、瑞士等國家的增值稅立法均有增值稅法與增值稅法實施條例。 在楊小強看來,徵求意見稿堅持稅收法定原則,體現了高質量發展理念。「如對增值稅法第四章中支持農業、教育、醫療、養老等稅收優惠政策的標準進行了細化,並規定稅收優惠政策的適用範圍、標準、條件和稅收徵管措施等應當依法及時向社會公開,有利於支持經濟社會高質量發展,保護納稅人的合法權益。」 梁季表示,徵求意見稿解釋、細化了增值稅法的相關條款,增強稅制的確定性和可操作性,如對非應稅交易對應的進項稅額、不動產等長期資產進項稅額抵扣規則進行了優化,既符合增值稅徵抵一致的基本原理,也符合國際實踐慣例;細化明確相關徵管規定,順應經濟社會發展的新變化。 「增值稅法實施條例對增值稅法第四條第四項所稱『服務、無形資產在境內消費』作了細化解釋。」楊小強說,「服務、無形資產在境內消費」,一直是國際增值稅的立法難題,但目前缺乏國際增值稅條約等予以有效協調。徵求意見稿對不同國家的跨境銷售服務、無形資產的消費地判斷規則進行了學習研究,有吸收、創新與協調,既與國際接軌,也符合我國實際。
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