北京8月4日電 (記者 孫自法)在生命科學領域,基因組編輯技術的迅速發展和廣泛應用,為基礎研究和應用開發提供強大的技術支撐。不過,大片段DNA(脫氧核糖核酸)編輯一直面臨重大挑戰,對數千乃至數百萬鹼基的精準操縱更是基因編輯領域的核心難題,備受關注。 育種和基因治療有巨大應用潛力 來自中國科學院遺傳與發育生物學研究所(遺傳發育所)的消息說,該所高彩霞研究員團隊最新研發出一種新型可編程的染色體編輯技術(Programmable Chromosome Engineering,PCE)。該技術在動植物中實現了從千鹼基到兆鹼基級別DNA的多類型染色體精準操縱,顯著提升了真核生物基因組的操縱尺度和能力。 利用大片段DNA精準操縱技術,研究人員不僅能實現多基因疊加編輯,還可通過操控基因組結構變異,為作物性狀改良和遺傳疾病治療開闢新路徑。同時,該技術有望推動新型育種策略的發展,例如通過操縱遺傳連鎖、調控重組頻率實現育性控制,以及消除連鎖累贅,充分釋放野生種質資源中優異等位基因的育種潛力。此外,精準染色體編輯技術的突破將加速人工染色體構建,在合成生物學等新興領域也有重要的應用前景。 本項研究PCE系統的開發和精準染色體編輯示意圖。中國科學院遺傳發育所 供圖 這項攻克大片段DNA精準編輯的重要成果論文,北京時間8月4日深夜在國際知名學術期刊《細胞》(Cell)上線發表。審稿人評價認為,中國團隊發表的研究工作,代表了基因工程領域的重大突破,在育種和基因治療方面具有巨大的應用潛力。 系統應用受到3個關鍵問題制約 論文通訊作者高彩霞研究員介紹說,以基因編輯工具CRISPR及其衍生技術為代表的編輯系統,通過可編程的嚮導RNA(核糖核酸)引導Cas9等核酸酶靶向基因組特定位點,已廣泛應用於特定鹼基和短片段DNA的精準編輯。但針對大片段DNA編輯,現有工具在編輯效率、尺度、精準性及類型多樣性等方面仍存在明顯不足。 研究團隊發現,位點特異性重組酶(Cre-Lox)系統具有染色體水平DNA操縱潛力,其原理是在基因組中引入Lox序列後,由Cre重組酶介導Lox位點之間的DNA重組來實現全基因組範圍內的遺傳操縱。 然而,Cre-Lox系統的應用受到3個關鍵問題的制約:Lox位點固有的對稱性導致重組反應可逆,不利於目的編輯的發生;Cre酶作為四聚體工作,提升其活性的工程改造難度高;重組後特異性位點殘留,影響編輯的精準性。 構建兩個可編程染色體編輯系統 高彩霞指出,為逐一突破上述限制,在本項研究中,研究團隊構建出系統性技術路徑:首先,開發高通量重組位點快速改造平臺,並提出不對稱Lox位點設計原則,成功創製新型Lox變體,保持高效重組效率的同時將可逆重組活性降低至陰性對照水平。 其次,基於研究團隊此前自主開發的融合蛋白通用逆摺疊模型、結構與進化約束信息的蛋白定向進化平臺AiCE,實現對Cre蛋白多聚化界面的精準優化,獲得重組效率提升至3.5倍的工程化Cre蛋白變體。 最後,研究團隊創建並優化了重組酶的無痕編輯策略Re-pegRNA,利用引導編輯器的高效編輯特性,通過設計特異性pegRNA對重組後殘留的Lox位點進行「重引導編輯」,將其精準替換為原有基因組序列。 通過這三項技術的集成優化,研究團隊成功構建PCE與RePCE兩個可編程染色體編輯系統,可對不同Lox位點的插入位置和方向進行靈活編程,實現鹼基從千比特(kb)到兆比特(Mb)尺度的大片段DNA精準無痕操縱。 研究團隊表示,他們在動植物細胞中,利用新研發的系統已成功實現18.8 kb超大片段DNA的定點整合、5 kb序列的定向替換、12 Mb的染色體倒位、4 Mb的染色體刪除及整條染色體的易位。他們還利用新型大片段DNA精準操縱技術,成功創製含315 kb精準倒位的抗除草劑水稻種質,展示出其廣泛應用前景。 據了解,AiCE成果7月上旬已在線發表於《細胞》,並將與此次研究成果以背靠背形式於8月下旬在《細胞》紙質版正式刊出。(完)
北京8月13日電 (記者 陳建新 楊程晨)就臺灣花蓮縣富裡鄉學田村村長、陸配鄧萬華遭解職一事,國務院臺辦發言人朱鳳蓮13日表示,這是民進黨當局借所謂「國籍」問題打壓大陸配偶的又一惡行。 當天在北京舉行的國臺辦例行新聞發布會上,朱鳳蓮說,民進黨當局一再歧視欺凌大陸配偶群體,種種罪行,不一而足,其目的就是製造「綠色恐怖」,阻撓限制兩岸交流,打擊支持兩岸關係發展的力量。 她說,廣大在臺定居落戶的陸配群體是臺灣社會的重要成員,是臺灣同胞的家人和親人,在不同崗位上為臺灣經濟社會發展作出貢獻。民進黨當局區別對待、蓄意打壓,充分暴露其「臺獨」本性,表明其宣揚的「民主」「人權」都是騙人的鬼話。 民進黨當局近日預告修正有關大陸人士在臺定居辦法,相關人士稱須「剪繳」中華人民共和國護照。朱鳳蓮強調,中華人民共和國護照受到法律嚴格保護,任何組織或者個人不得偽造、變造、轉讓、故意損毀或者非法扣押護照。對於故意損毀中華人民共和國護照的有關組織和個人,我們將依法追究其法律責任。 她還提到,民進黨當局有關部門配合推動各種所謂「修法」,對臺灣同胞來往大陸極盡阻撓,對大陸居民往來臺灣極力限制,嚴重損害兩岸同胞的利益福祉,嚴重破壞臺灣同胞的正常生活。 據報導,民進黨當局擬修改有關規定,限制公務人員赴港澳。朱鳳蓮回應,民進黨當局出於謀「獨」本性,不斷操弄司法和行政手段製造「綠色恐怖」,阻撓港臺、澳臺交流交往,升高對立對抗,其卑劣伎倆註定失敗。 有臺媒報導,大陸一網紅日前以「商務履約」名義赴臺,遭當局以「涉嫌以虛假資料非法入境」為由逮捕收容。朱鳳蓮指出,民進黨當局為阻擾破壞兩岸人員交流交往,無所不用其極,處心積慮打壓相關人員、恐嚇臺灣民眾,不得人心。島內綠媒和別有用心之人更是惡意炒作、抹黑,企圖誤導輿論,充分暴露他們挑撥兩岸對立對抗的險惡用心。 客貨兩用滾裝船「海峽號」於8月6日恢復貨運直航。「『海峽號』重啟受到兩岸民眾的熱烈歡迎。」朱鳳蓮表示,由於民進黨當局阻撓限制,兩岸民眾期盼已久的兩岸海上客運直航迄未恢復。兩岸間恢復正常海上客運航線在大陸方面不存在任何障礙。民進黨當局應充分考慮兩岸民眾及航運企業的訴求,儘快全面恢復兩岸海上客運直航。(完)
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